兔球虫重组蛋白 GAPDH 和 14-3-3 对兔感染中型艾美耳球虫的免疫保护效果评价
汤春佳1 马义博1 鲁志伟1 孙卓越1 汪骆1 朱小伟1 任永军2,3 杨光友1*
1.四川农业大学动物医学院 2.四川省畜牧科学研究院 3.动物遗传育种四川省重点实验室
摘要：本研究旨在评估中型艾美耳球虫（Eimeria media）重组蛋白r Em-GAPDH和肠艾美耳球虫（Eimeria intestinalis）重组蛋白rEi-14-3-3对感染中型艾美耳球虫家兔的免疫保护效力，为开发中型艾美耳球虫重组亚单位疫苗提供依据。将54只35日龄无球虫感染幼兔随机分为6组：空白对照组（PBS）、不免疫攻虫组（PBS）、Trx-His-S tag攻虫对照组（100μg Trx-His-S tag蛋白+1mg Quil-A）、rEi-14-3-3免疫组（100μg r Ei-14-3-3蛋白+1 mg Quil-A）、rEm-GAPDH免疫组（100μg rEm-GAPDH蛋白+1 mg Quil-A）和rEm-GAPDH与rEi-14-3-3联合免疫组（每个蛋白各100μg+1 mg Quil-A），各组均皮下注射免疫。首免后14 d以同等剂量加强免疫一次，二免后14 d，除空白对照组外，其余各组每兔经口感染5×104个中型艾美耳球虫孢子化卵囊，观察每组临床症状，定期采血称重。感染10 d后剖检，观察肠道病变并测定卵囊排出量（OPG）、相对增重、特异性IgG抗体及细胞因子等。结果显示：与攻虫对照组相比，三个免疫组感染后的临床症状和肠道病变轻微。rEi-14-3-3免疫组、rEm-GAPDH免疫组和rEm-GAPDH与rEi-14-3-3联合免疫组的卵囊减少率分别为64.49%、49.06%和70.68%，相对增重均显著高于不免疫攻虫组（P<0.05）,ACI值分别为163.47、150.24和171.68。免疫组的特异性IgG抗体水平及细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-10水平均显著高于对照组（P<0.05）。综上，rEm-GAPDH和rEi-14-3-3可以减少增重损失和卵囊排出，诱导宿主细胞与体液免疫应答，具有免疫保护潜力，可作为中型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的候选抗原。
关键词：兔;中型艾美耳球虫;三磷酸甘油醛脱氢酶;14-3-3蛋白;重组蛋白;免疫保护;
基金资助：四川省科技计划项目（2022ZHYZ0003）；
专辑：农业科技
专题：畜牧与动物医学
分类号：S858.291
