疥螨eIF4E和UPP基因的克隆表达及免疫鉴定
张倩 徐路阳 郭茂川 李晓萍 李敏 何冉
四川农业大学动物医学院
摘要: 目的 克隆、表达疥螨(Sarcoptes scabiei,S.scabiei)真核翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factor 4E,eIF4E)和尿苷磷酸化酶(Uridine phosphorylase, UPP),并鉴定其免疫原性。方法 首先提取兔疥螨总RNA,通过反转录聚合酶链式反应得到cDNA,根据NCBI数据库eIF4E和UPP序列设计引物，PCR扩增获得疥螨eIF4E、UPP完整基因序列，对基因序列进行生物信息学分析，构建pET-32a(+)重组质粒，SDS-PAGE验证重组蛋白表达情况，最后免疫印迹法鉴定其免疫原性。结果 疥螨eIF4E基因的开放阅读框(ORF)长度约为561 bp,编码186个氨基酸，疥螨UPP基因的ORF长度约为939 bp,编码312个氨基酸。与其他物种氨基酸序列比对显示，eIF4E、UPP氨基酸序列与粉尘螨、屋尘螨、热带无爪螨亲缘关系较近，进化树分析eIF4E、UPP氨基酸序列与节肢类动物在同一分支。同时，成功诱导表达了疥螨重组eIF4E和UPP蛋白，免疫印迹结果表明重组eIF4E和UPP蛋白可与自...更多
关键词: 疥螨;真核翻译起始因子;尿苷磷酸化酶;克隆表达;免疫原性;
基金资助: 四川省科技计划应用基础项目（No.2020YJ0114）~~；
引用: 张倩,徐路阳,郭茂川等.疥螨eIF4E和UPP基因的克隆表达及免疫鉴定[J].中国人兽共患病学报,2023,39(05):433-439.
