肠艾美耳球虫重组微线蛋白2对家兔免疫保护效果评价
陈 浩 郝 哥 蒲家艳 肖 洁 熊常明 何 维 朱煜华 许力文 姜 庆 杨光友
1.四川农业大学动物医学院 2.雅安职业技术学院
摘 要：本研究旨在评价肠艾美耳球虫重组微线蛋白 2（rEiMIC2）对兔的免疫保护效果，为肠艾美耳球虫重组亚单位疫苗的研究提供参考。在肠艾美耳球虫转录组数据中筛选出 EiMIC2 基因，进行克隆、原核表达和蛋白纯化，并采用免疫印迹检测重组蛋白的免疫反应性。将 35 日龄无球虫新西兰幼兔 32 只随机分为 4 组（未免疫未攻虫组、未免疫攻虫组、pET32a 载体组和 rEiMIC2 免疫组），每组 8 只，未攻虫组和攻虫组每只颈部皮下注射 1 mL 无菌 PBS，pET32a 载体组和 rEiMIC2 免疫组每只分别接种 100 μg pET32a 载体蛋白、rEiMIC2，首免后 2 周进行二免。二免 14 d 后，除去未免疫未攻虫组其余 3 组每只新西兰兔口服接种 5×104个肠艾美耳球虫孢子化卵囊；攻虫 14 d 后安乐死所有新西兰兔。重组蛋白免疫兔后通过观察临床症状、肠道病变、测定兔的相对增重率、卵囊减少率、ACI 值和料肉比以及检测血清中特异性 IgG、IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ 综合评价 rEiMIC2 的免疫保护效果。结果显示，EiMIC2 基因 ORF 长度为 1 605 bp，编码的蛋白分子质量约为 57.68 Ku。免疫印迹显示 rEiMIC2 能够被阳性血清所识别，表明具有良好的免疫反应性。免疫保护试验显示：攻虫后各组幼兔陆续出现精神沉郁和腹泻的症状，未免疫攻虫组和 rEiMIC2 免疫组各有 1 只兔死亡；rEiMIC2 免疫组相对增重率为 73.97%，卵囊减少率为 69.89%，ACI 值为 136.97，料肉比为 3.98:1，与未免疫攻虫组差异显著（P<0.05）；rEiMIC2 免疫组肠道病变与未免疫攻虫组相比较轻，血清中特异性 IgG 水平显著高于未免疫攻虫组（P<0.05）。综上，rEiMIC2 免疫兔后，能有效减少卵囊排出和增重损失，减轻肠道损伤，具有一定的保护效果。
关键词：肠艾美耳球虫；微线蛋白 2；兔；免疫保护
基金资助：四川省雅安市重点研发项目（23ZDYF0004）
引用：陈浩,郝哥,蒲家艳,等.肠艾美耳球虫重组微线蛋白2对家兔免疫保护效果评价[J/OL].畜牧兽医学报:1-14[2024-06-28].
