大型艾美耳球虫重组蛋白GAPDH对兔的免疫保护效果评价
郑若愚,肖洁,白鑫,陈浩,蒲家艳,任永军,杨光友
1.四川农业大学动物医学院 2.四川省畜牧科学研究院 3.动物遗传育种四川省重点实验室
摘要:本研究旨在评价大型艾美耳球虫重组蛋白(rEm-GAPDH)对兔的免疫保护效果,为大型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的研制奠定基础。根据转录组数据筛选出Em-GAPDH基因,进行原核表达与蛋白纯化;将50只45日龄无球虫感染幼兔随机分为5组(空白对照组、不免疫攻虫组、Trx-His-S tag攻虫对照组、Quil-A saponin攻虫对照组和rEm-GAPDH免疫组),分别经颈部皮下注射1 mL PBS、1 mL PBS、1 mL PBS含100μg pET-32a空载蛋白和1 mg Quil-A、1 mL PBS含1 mg Quil-A、1mL 100μg rEm-GAPDH含1 mg Quil-A,首免14 d后同等剂量加强免疫,二免14 d后每只兔经口感染1×105个大型艾美耳球虫孢子化卵囊,观察各组兔临床症状,每周固定时间采血和称重,感染14 d后宰杀剖检并测定和统计各组兔的卵囊排出量、相对增重、特异性IgG抗体和细胞因子等。结果成功表达了重组蛋白rEm-GAPDH,大小在59 ku左右,且大部分表达在包涵体。免疫保护试验表明:感染后不免疫攻虫组出现症状,而免疫...更多
关键词:兔;大型艾美耳球虫;三磷酸甘油醛脱氢酶;重组蛋白;免疫保护;
基金资助:四川省科技计划项目(2022ZHYZ0003); 国家重点研发计划(2017YFD0501200);
引用:郑若愚,肖洁,白鑫等.大型艾美耳球虫重组蛋白GAPDH对兔的免疫保护效果评价[J].畜牧兽医学报,2023,54(10):4338-4349.